El consumo de drogas de abuso durante la gestación es un grave problema social que incide en la morbilidad materno-fetal y no se conoce con profundidad los mecanismos que llevan a efectos deletéreos en la edad adulta de la progenie. Evidencia indica que las anfetaminas alteran la funcionalidad de las neuronas dopaminérgicas meso-cortico- límbicas pero no se conoce su efecto sobre las neuronas dopaminérgicas hipotalámicas las cuales mantienen un tono inhibidor sobre la síntesis y secreción de prolactina hipofisaria. Prolactina es una hormona liberada por estrés. El estrés y las drogas de abuso como las anfetaminas activan el eje hipotálamo adrenal y prolactina liberada en respuesta al estrés modula la actividad del el eje hipotálamo adrenal. Evidencia previa obtenida en nuestro laboratorio sugiere que el tratamiento prenatal con anfetaminas alteraría la síntesis y secreción de PRL en ratas adultas en respuesta al estrés y la acción de estradiol. En este proyecto nos proponemos profundizar en estos resultados obtenidos incluyendo nuevas técnicas de estudio con el fin de darles más solidez a los mismos. Estudiaremos la morfometría y la expresión de las subpoblaciones de células lactotropas por inmunocitoquímica a nivel de microscopía electrónica. Evaluaremos por inmunofluorescencia la actividad de las neuronas dopaminérgicas hipotalámicas. La expresión hipotalámica del receptor dopaminérgico D2 así como la de su transportador serán medidas por RT-PCR y se correlacionarán con los niveles séricos de prolactina medidos por radioinmunoanálisis. Evaluaremos también el estado de ansiedad en el laberinto en cruz elevado potenciado por el estrés que nos permitirá analizar este comportamiento en animales que fueron expuestos a un tratamiento prenatal con anfetaminas y correlacionarlo con los niveles de prolactina séricos.

Palabra claves: Anfetaminas, prolactina, estradiol

The use of drugs of abuse during pregnancy is a serious social problem that affects maternal-fetal morbidity. The mechanisms that lead to deleterious effects in the adulthood of the progeny are not fully understood. Evidence indicates that amphetamines alter the functionality of meso-corticolimbic dopaminergic neurons, but their effects on hypothalamic dopaminergic neurons, which maintain an inhibitory tone on the synthesis and secretion of pituitary prolactin, are not known. Prolactin is released by stress. Stress and drugs of abuse such as amphetamines activate the hypothalamic adrenal axis, and prolactin released in response to stress modulates the activity of the hypothalamic adrenal axis. Previous evidence obtained in our laboratory suggests that prenatal treatment with amphetamines would alter the synthesis and secretion of PRL in adult rats in response to stress and the action of estradiol. In this project we intend to delve into these results obtained, including new study techniques in order to give them more solidity. We will study the morphometry and expression of lactotroph cell subpopulations by immunocytochemistry at the level of electron microscopy. We will evaluate by immunofluorescence the activity of dopaminergic hypothalamic neurons. Hypothalamic expression of dopaminergic D2 receptor and its transporter will be measured by RT-PCR and will be correlated with serum prolactin levels measured by radioimmunoassay. A correlation between this last approach with prolactin release in response to stress and estradiol treatment will be done.

Keywords: amphetamines, prolactin, estradiol

Trypanosoma cruzi es un parásito intracelular obligado causante de la enfermedad de Chagas. La forma infectiva, llamada tripomastigote, es sumamente móvil gracias a su vigoroso flagelo. Esta estructura le permite al parásito ingresar de manera activa a la célula a medida que se va conformando la vacuola que lo alberga. Por otro lado, la tensión de una membrana es una propiedad mecánica que da cuenta de la fuerza necesaria para deformar la misma. Partimos de la hipótesis de que durante el proceso de invasión habría una interacción mecánica entre el parásito y la membrana plasmática de la célula huésped. Esto lo estudiaremos desde dos puntos de vista. Por un lado, indagaremos si el tripomastigote, que ejerce una fuerza en dirección perpendicular sobre la superficie de la membrana plasmática, altera la tensión de esta. Para lograr esto mediremos directa (pinzas ópticas) e indirectamente (número de caveolas) parámetros que nos permitan determinar si la acción del parásito sobre la membrana plasmática efectivamente modifica la tensión. Por otro lado, investigaremos si el estado de tensión superficial de la membrana plasmática influye sobre la susceptibilidad celular a la invasión. Para esto, modificaremos la tensión de la membrana plasmática con distintas estrategias (shock osmótico, silenciamiento de Ezrina por ARN de interferencia y tratamiento con inhibidores de polimerización de actina) para evaluar si este parámetro afecta en número de células infectadas. Esperamos que nuestros resultados nos permitan entender la interacción entre T. cruzi y la célula huésped desde una perspectiva biomecánica.

Palabra claves: CHAGAS, BIOFISICA, MEMBRANA PLASMATICA

Trypanosoma cruzi trypomastigote is highly motile due to its vigorous flagellum. The trypomastigote motility has a major role in the invasion of the host cell. Also, it is important to mention that plasma membrane tension is a mechanical property directly related to the force needed to deform a membrane. We hypothesize that during the invasion process a mechanical interaction between the parasite and the host cell plasma membrane occurs. We will assess this from two points of view. On the one hand, we will investigate whether the parasite, that exerts a force perpendicular to the plasma membrane surface, is capable of altering the membrane tension. To achieve this, we will quantify directly (optical tweezers) or indirectly (quantifying the number of caveolae) the effect of trypomastigote on the plasma membrane tension. On the other hand, we will investigate whether the state of plasma membrane tension can impact on host cell susceptibility to infection. To perform this, we will modulate plasma membrane tension with different strategies (osmotic shock, Ezrin knockdown with small interfering RNA and treatment with actin polymerization inhibitors) to assess whether this parameter affects the percentage of infected cells. We trust our results will provide a better understanding of host cell-T. cruzi interaction from a biomechanical perspective.

Keywords: CHAGAS, BIOPHYSICS, PLASMA MEMBRANE

La Enfermedad de Chagas (EC) es una patología infecciosa crónica, endémica en Argentina y en Latinoamérica, y con elevada diseminación a países no endémicos. Si bien la implementación de mejores técnicas diagnósticas está contribuyendo a tener un panorama claro de la presencia de esta enfermedad en nuestro país, la reducción, e idealmente la erradicación, de la misma, estarán a cargo de la utilización de tratamientos que sean más eficaces y tolerables que los disponibles en la actualidad. El organismo causante de la EC es el protozoario flagelado Trypanosoma cruzi, un parásito unicelular eucariota que ha logrado permanecer entre los seres vivos y propagarse entre ellos alternando su ciclo biológico entre un insecto vector y el hospedador mamífero. En el ser humano la infección consta de una etapa aguda caracterizada por una elevada parasitemia y una etapa crónica caracterizada por la presencia de nidos parasitarios (nidos de amastigotes) en las fibras musculares sobre todo a nivel cardíaco y digestivo y provocando aproximadamente en un tercio de los individuos infectados la aparición de síntomas clínicos característicos. A pesar de las nuevas drogas y propuestas terapéuticas para el Chagas que existen en la actualidad, ninguna de ellas ha mostrado, hasta el momento, ser superadora de las dos terapias existentes, Benznidazol y Nifurtimox, evidenciando la necesidad de seguir las investigaciones en este sentido. En este proyecto proponemos el estudio de dos blancos farmacológicos en T. cruzi y el efecto de drogas que actúan sobre estos blancos en modelos de infección crónica, etapa de mayor importancia para el desarrollo de nuevos tratamientos.

Palabra claves: Trypanosoma cruzi, carvedilol, autofagia

Chagas Disease (CD) is a chronic infectious pathology, endemic in Argentina and Latin America, and with high dissemination to non-endemic countries. Although the implementation of better diagnostic techniques is contributing to a clear picture of the presence of this disease in our country, its reduction, and ideally its elimination, will be dependent of the use of new treatments more effective and tolerable than those currently available. The organism that causes CD is the flagellated protozoan Trypanosoma cruzi, an unicellular eukaryotic parasite that has managed to remain among living beings and spread among them, alternating its biological cycle between an insect vector and the mammalian host. In humans, the infection consists of an acute stage characterized by high parasitaemia and a chronic stage characterized by the development of parasitic nests (amastigote nests) in muscle fibers, especially at the cardiac and digestive levels and causing in approximately one third of infected individuals the appearance of characteristic clinical symptoms. Despite the new drugs and therapeutic proposals for Chagas that currently exist, none of them has proven to be superior to the two existing therapies, Benznidazole and Nifurtimox, highlighting the necessity to continue the research in this matter. In this project we propose the study of two pharmacological targets in T. cruzi and the effect of drugs that inhibit these targets in models of chronic infection, a stage of greatest importance for the development of new treatments.

Keywords: Trypanosoma cruzi, carvedilol, autophagy

Brucella es considerada una bacteria patógena intracelular-extracelular facultativa Los mecanismos molecularesresponsables de las estrategias de sobrevida intracelular no son completamente conocidos. Por tal razón, nuestroequipo de investigación se ha abocado al estudio de proteínas involucradas en el transporte endocítico de Brucella abortus (Arenas et al., 2000, 2010, 2015). Esta especie bacteriana transita a través de la vía endocítica y la vacuola quecontiene la bacteria se asocia con los compartimentos endosomales temprano y tardío). Brucella puede escapar dela fagocitosis, una forma especial de endocitosis, y esto está relacionado con su virulencia al promover la invasión y las infecciones crónicas. Sin embargo, los mecanismos moleculares exactos por medio de los cuales escapa a la fagocitosis son aún desconocidos. En los últimos años, este equipo de investigación ha elaborado protocolos que permiten estudiar a Brucella en las diferentes etapas de la vía fagocítica. Nuestros resultados han indicado que la destrucción de la cepa viva virulenta de Brucella abortus se inhibe en los estadios tempranos del proceso fagocítico. Los fagosomas que contienen estas bacterias, se fusionan menos con los lisosomas y aún en los casos en que esto ocurre, las bacterias resisten la digestión fagolisosomal. Rab5 y otras proteínas Rab, están presentes en el endosoma temprano(cuya activación da como resultado una señal para el reclutamiento de proteínas efectoras para la internalización dela bacteria La pequeña GTPasa Rab5 tiene un papel fundamental en el tráfico intracelular de Brucella, desempeñando un papel clave en el transporte de las vesículas a sus compartimentos aceptores La proteína quinasa B (tambiénconocida como Akt) posee tres isoformas (Akt1, Akt2 y Akt3), desempeñando un papel fundamental en la regulación dediversas funciones celulares. La vía de señalización de PI3k/Akt desempeña un papel fundamental en la regulación dela supervivencia celular, la proliferación, la síntesis de proteínas y el metabolismo del glucógeno. La activación de PI3kgenera la activación de Akt, lo cual promueve la inactivación de las Rab-GTPasas. La inactivación de Rab5 impediría elmovimiento de los fagosomas que contienen Brucella hacia los lisosomas, promoviendo la supervivencia intracelularde Brucella en células He-La. Sin embargo, pocos estudios se han realizado sobre el tráfico intracelular de Brucella en fagaocitos profesionales, como los macrófagos.

Palabra claves: Brucella, macrófagos, GTPasa-Rabs

Brucella is considered an intracellular-facultative extracellular pathogenic bacterium The molecular mechanismsresponsible for intracellular survival strategies are not completely known. For this reason, our research team hasfocused on the study of proteins involved in the endocytic transport of Brucella abortus (Arenas et al., 2000, 2010, 2015).This bacterial species transits through the endocytic pathway and the vacuole containing the bacterium is associatedwith the early and late endosomal compartments). Brucella can escape phagocytosis, a special form of endocytosis, andthis is related to its virulence by promoting invasion and chronic infections. However, the exact molecular mechanismsby which it escapes phagocytosis are still unknown. In recent years, this research team has developed protocols thatallow Brucella to be studied in the different stages of the phagocytic pathway. Our results have indicated that thedestruction of the virulent live strain of Brucella abortus is inhibited in the early stages of the phagocytic process. Thephagosomes that contain these bacteria fuse less with the lysosomes and even in cases where this occurs, the bacteriaresist phagolysosomal digestion.Rab5 an another Rabs proteins, are present in the early endosome (whose activation results in asignal for the recruitment of effector proteins for the internalization of the bacterium. The small GTPase Rab plays a key role in the intracellular traffic of Brucella, playing a key role in the transport of the vesicles to their receptorcompartments Protein kinase B (also known as Akt) has three isoforms (Akt1, Akt2 and Akt3), playing a key role inthe regulation of various cellular functions. Akt plays a key role in the regulation of cell survival, proliferation, proteinsynthesis and glycogen metabolism, activation of PI3k generates activation of Akt, which promotes the inactivation ofRab-GTPases. Rab5 would impede the movement of phagosomes containing Brucella towards lysosomes, promoting thesurvival Intracellular Brucella in He-La cells. However, few studies have been performed on the intracellular trafficking ofBrucella using professional phagocytes, such as macrophages.

Keywords: Brucella, macropheges, GTPasa-Rabs

El desarrollo de nuevos esquemas terapéuticos que permitan mejorar la sobrevida de los pacientes con cáncer de mama (CM) continúa siendo un gran desafío. Nuestra hipótesis de trabajo es que la administración conjunta de olaparib y doxorrubicina tiene un efecto sinérgico en células de CM sin proteína BRCA1 funcional, a través de la formación de los complejos PARP-ADN. El objetivo general es optimizar la terapia personalizada en CM deficiente en el sistema de reparación del ADN por recombinación homóloga. Los objetivos específicos son: 1) Establecer si la administración simultánea de olaparib y doxorrubicina incrementa la sensibilidad individual de estas drogas en células tumorales mamarias humanas con mutación patogénica en el gen BRCA1. 2) Determinar el daño en el ADN inducido por la administración individual y combinada de olaparib y doxorrubicina en células tumorales mamarias humanas con mutación patogénica en el gen BRCA1. 3) Determinar la formación de complejos PARP-ADN inducidos por la administración individual y simultánea de olaparib y doxorrubicina en células tumorales mamarias humanas con mutación patogénica en el gen BRCA1. Se utilizará la línea celular de CM triple negativa HCC1937 que no expresa la proteína BRCA1. Se realizará: ensayo clonogénico, viabilidad celular por MTT, determinación de Anexina V por citometría de flujo, cuantificación de focos gammaH2AX mediante inmunofluorescencia y cuantificación de complejos PARP-ADN por western blot. Esperamos encontrar un esquema terapéutico que permita reducir in vitro las dosis administradas de doxorrubicina sin disminuir su acción antitumoral.

Palabra claves: CÁNCER DE MAMA, PARP, BRCA1

The development of new therapeutic schemes to improve the survival of patients with breast cancer (BC) continues to be a great challenge. Our working hypothesis is that the simultaneous administration of olaparib and doxorubicin has a synergistic effect in BC cells without functional BRCA1 protein, through the formation of PARP-DNA complexes. The main objective is to improve personalized therapy in DNA repair deficient BC by homologous recombination. The specific objectives are: 1) To establish whether the simultaneous administration of olaparib and doxorubicin increases the individual sensitivity of these drugs in human mammary tumor cells with a pathogenic mutation in the BRCA1 gene. 2) To determine DNA damage induced by the simultaneous and individual administration of olaparib and doxorubicin in human mammary tumor cells with a pathogenic mutation in the BRCA1 gene. 3) To determine the formation of PARP-DNA complexes induced by the individual and simultaneous administration of olaparib and doxorubicin in human mammary tumor cells with a pathogenic mutation in the BRCA1 gene. The triple negative BC cell line HCC1937 will be used. It will be carried out: clonogenic assay, cell viability by MTT, determination of Annexin V by flow cytometry, quantification of gammaH2AX foci by immunofluorescence and quantification of PARP-DNA complexes by western blot. We hope to find a therapeutic scheme that allows us to reduce in vitro the administered doses of doxorubicin without diminishing its antitumor action.

Keywords: BREAST CANCER, PARP, BRCA1

Este proyecto está enfocado al estudio del mecanismo de acción de drogas lisosomotrópicas y prooxidativas sobre células de tumores mamarios, orientado a la acción sobre lisosomas. Esta organela podría participar en la patogénesis del cáncer mamario, y se pretende evaluar si estas drogas alteran selectivamente la biogenesis y funcionalidad lisosomal

Palabra claves: Células tumorales mamarios, drogas antitumorales, lisosomas

This project is focused on the study of the mechanism of action of lysosomotropic and prooxidative drugs on mammary tumor cells, oriented to the action on lysosomes. This organelle could participate in the pathogenesis of breast cancer, and it is intended to evaluate whether these drugs selectively alter lysosome biogenesis and functionality.

Keywords: Breast cancer cells, antitumor drugs, lysosomes

Se pretende determinar los niveles de estrés oxidativo en los pacientes con leucoplasia, liquen oral y queilitis actínica, su relación con la expresión de RAD51, compararla con zonas sanas, sin lesiones bucales de mismo paciente y con los valores obtenidos a lo largo del curso evolutivo de las patologías después de 1 mes, 3 meses y 6 meses de tratamiento. Se proyecta determinar las variaciones en dichos niveles que ocurren con el tratamiento con imiquimod, corticoides locales o tretinoína local en estos pacientes. Se determinarán los niveles de estrés oxidativo mediante la técnica de Fluorescencia de dihidroetidina (DHE) a través de la titulación en células exfoliadas de la mucosa. Además se plantea realizar la determinación del gen RAD51, que interviene en la reparación del ADN, en las diferentes etapas de los tratamientos ya que en un estudio previo hemos observado diferencia significativa entre el nivel de estrés oxidativo en las primeras etapas del tratamiento y su descenso con posterioridad. Se ha demostrado que el incremento del estrés oxidativo disminuye la expresión de RAD51. Además se ha encontrado una alta correlación este la expresión de este gen y el grado de malignidad del cáncer oral.

Palabra claves: Desórdenes potencialmente malignos, estrés oxidativo,, aductos oxidativos del ADN 8-OH guanosina

It is intended to determine the levels of oxidative stress in patients with leukoplakia, oral lichen and actinic cheilitis, its relationship with the expression of RAD51, compare it with healthy areas, without oral lesions of the same patient and with the values obtained throughout the evolutionary course of pathologies after 1 month, 3 months and 6 months of treatment.It is planned to determine the variations in these levels that occur with treatment with imiquimod, local corticosteroids or local tretinoin in these patients. Oxidative stress levels will be determined using the dihydroetidine fluorescence (DUS) technique through titration in exfoliated mucosal cells. In addition, it is proposed to carry out the determination of the RAD51 gene, which intervenes in dna repair, in the different stages of treatments since in a previous study we have observed a significant difference between the level of oxidative stress in the early stages of treatment and its subsequent decrease.

Keywords: Potentially malignant disorders, oxidative stress dihyroetidium, RAD51

Nuestra propuesta para este proyecto es sintetizar sub-estructuras alfa-bromoacrilatos beta-sustituidos, como también los alfa-iodo acrilatos beta-sustituidos y cloroacrilatos que, hasta el momento, no fueron obtenidos en nuestro grupo de investigación. Para esta metodología se propone utilizar N-Iodo y N-clorosuccinimida (NIS y NCS) en fase acuosa, haciendo uso de fosfonatos adecuados empleados en la reacción de Horner-Wadsworth-Hemmon. Estas reacciones en fase acuosa están en concordancia con los principios de la química verde, que propicia la protección del medio ambiente. Los alfa-cloro, alfa-bromo y alfa-iodoacrilatos (beta-sustituidos) poseen en su estructura un grupo carbonilo (de una funcionalización éster) conjugado con un doble enlace, al igual que los primeros compuestos bioactivos que obtuvimos en nuestro grupo de trabajo y que demostramos inhiben la degranulación de mastocitos. Estos compuestos poseen también un halógeno (cloro, bromo, iodo) en el carbono alfa de esta conjugación. Considerando estos antecedentes, nuestra propuesta es trabajar con los compuestos sintéticos ya mencionados en este modelo biológico. Nuestra actual hipótesis plantea que estos compuestos pueden ser potenciales inhibidores en la activación de mastocitos inducida por estímulos pro-inflamatorios, disminuyendo así la producción de mediadores de la inflamación en respuesta a la injuria. La identificación y estudio de los mecanismos de acción de estos compuestos bioactivos constituirá un aporte de interés con implicancias en la protección de enfermedades alérgicas, inflamatorias y tumorales.

Palabra claves: haloacrilatos, mastocitos, inflamación

Our proposal for this project is to synthesize substructures alpha-bromoacrylates beta-substituted, as well as alpha-iodo acrylates beta-substituted and chloroacrylates that, so far, were not obtained in our research group. For this methodology it is proposed to use N-Iodo and N-chlorosuccinimide (NIS and NCS) in aqueous phase, making use of suitable phosphonates employed in the Horner-Wadsworth-Hemmon reaction. These aqueous phase reactions are in accordance with the principles of green chemistry, which is conducive to environmental protection. The alpha-chloro, alpha-bromo and alpha-iodoacrylates (beta-substituted) possess in their structure a carbonyl group (from an ester functionalization) conjugated with a double bond, just like the first bioactive compounds that we obtained in our working group and that we demonstrated inhibit mast cell degranulation. These compounds also possess a halogen (chlorine, bromine, iodine) at the alpha carbon of this conjugation. Considering this background, our proposal is to work with the synthetic compounds already mentioned in this biological model. Our current hypothesis proposes that these compounds may be potential inhibitors in mast cell activation induced by pro-inflammatory stimuli, thus decreasing the production of inflammatory mediators in response to injury. The identification and study of the mechanisms of action of these bioactive compounds will constitute a contribution of interest with implications in the protection of allergic, inflammatory and tumor diseases.

Keywords: haloacrylates, mast cells, inflammation

Si bien el desarrollo de estrategias farmacológicas para modular la activación de mastocitos ha sido, durante las últimas décadas, el objeto de estudio de muchos laboratorios relacionados con la industria farmacéutica, la búsqueda de nuevas estrategias farmacológicas vinculadas con la activación de mastocitos en la inflamación neurogénica constituye todavía una deuda pendiente. El tema propuesto en este trabajo es el estudio de las drogas dehidroleucodina y xantatina sobre la activación de mastocitos inducida por el neuropéptido proinflamatorio neuromedina U. Los agentes sesquiterpenos dehidroleucodina y xantatina podrían representar nuevas estrategias farmacológicas en el tratamiento de procesos inflamatorios vinculados con la activación de los mastocitos en el escenario de la inflamación neurogénica, aportando una nueva línea de investigación en la terapéutica del dolor neuropático.

Palabra claves: mastocitos, dolor neuropático, neuropéptidos proinflamatorios

Although the development of pharmacological strategies to modulate the activation of mast cells has been, during the last decades, the object of study of many laboratories related to the pharmaceutical industry, the search for new pharmacological strategies linked to the activation of mast cells in neurogenic inflammation is still an outstanding debt. The topic proposed in this work is the study of the drugs dehydroleukodine and xanthine on the activation of mast cells induced by the proinflammatory neuropeptide neuromedin U. The sesquiterpene agents dehydroleukodine and xanthine could represent new pharmacological strategies in the treatment of inflammatory processes linked to the activation of mast cells in the setting of neurogenic inflammation, providing a new line of research in the therapeutics of neuropathic pain.

Keywords: Mast cells, neuropathic pain, proinflammatory neuropeptides

Este proyecto se propone estudiar el conocimiento de sentido común sobre diversidad en educación en un contexto educativo de educación superior en salud. Se reconoce a la equidad y al respeto por la diversidad como características esenciales de la concreción de los Derechos Humanos y, en especial, del Derecho Humano a la educación. Se propone como marco teórico la Teoría de las Representaciones Sociales y se utilizarán entrevistas, observación de prácticas de enseñanza y análisis documental con el objetivo de describir las representaciones sobre diversidad y equidad en relación con el rendimiento académico.

Palabra claves: derechos humanos, educación superior, representaciones sociales

This project aims to study common sense knowledge about diversity in education in an educational context of higher education in health. Equity and respect for diversity are recognized as essential characteristics of the realization of Human Rights and, especially, of the Human Right to education. The Theory of Social Representations is proposed as a theoretical framework and interviews, observation of teaching practices and documental analysis will be used in order to describe the representations about diversity and equity in relation to academic performance.

Keywords: Human Rights, higher education, social representations